小鼠主动脉缩窄技术诱导左心室肥厚主动脉

主动脉缩窄（transverseabdominalaorticconstriction，TAC），使主动脉压力升高而增加后负荷，根据缩窄的不同部位可以分为主动脉弓缩窄和腹主动脉缩窄。主动脉弓缩窄法是通过手术的方法将头臂干与左颈总动脉之间的主动脉弓的直径缩窄至0.4mm。该模型产生明显的左心室肥厚(leftventricularhypertrophy，LVH)，左心室僵硬度改变以及舒张功能的减退，循环中出现血管加压素和心房利钠肽的增加，但不激活肾素血管紧张素系统，也不导致左心室收缩功能不全。适合于研究高血压性心脏病、左心室肥厚演变为心力衰竭时的心肌力学特性、病理变化以及心肌肥厚的分子机制。该方法造模成功率高，时间短，但在不同品系动物心室重构的效果差异大，如C57BL6小鼠实行TAC之后很快发展为左心室扩张，而在其他品系的小鼠则不易出现。本实验采取小鼠微创TAC技术（主动脉弓缩窄法）具有非常低的手术死亡率和术后死亡率，同时高效诱导左心室肥厚。

主动脉弓缩窄微创手术要点：

1.用刀片在颈部做纵向中线切口，从胸骨上至胸部中部切开10mm以上切口，露出胸骨

2.用显微外科钳将气管前肌分开，露出气管。

3.钝性解剖和胸骨后面的肌肉来移开胸膜。

4.做一个3-4mm的胸骨上切口。胸骨向下部分小切口稍微向左。

5.用7–0缝合线从两侧的第二肋间自内到外拉开肋-胸骨角，避免损伤肋间胸腔内血管或胸膜。

6.轻轻移开气管前肌肉、纵隔脂肪和胸腺，在解剖镜下用弯镊观察

主动脉弓。特别注意不要触摸或损伤顶胸膜，以防止气胸的发生。

7.用血管钳将主动脉弓下的软组织暴露出来，然后轻轻展开钳口钝性分离组织。

8.用6–0缝合线线穿过结扎辅助器。

9.将27G针头放置在主动脉弓旁作为缩窄直径标尺，在右侧无名动脉和左侧颈总动脉之间的主动脉结扎，确保所有结都是平的。

10.结扎后，快速并轻柔地取出针，以获得直径为0.4mm的狭窄，主动脉保持65-70%的收缩。

11.检查主动脉弓周围软组织、胸骨边缘和气管前肌肉的止血情况。去除用于展开胸骨边缘的缝合线。

12.从左第二肋外侧到内侧用6-0缝合线缝合，保持靠近肋-胸骨角，避免损伤肋间胸腔内血管或胸膜。

13.依次缝合胸骨肌肉和皮肤。

14.左心肌肥厚在术后7天便可产生，并随时间增加而逐渐严重。

结扎主动脉弓的位置

小鼠胚胎心脏发育阶段、四腔心脏生长和形成的示意图

（HF,HeartFields;CM,CardiogenicMesoderm;AP,ArterialPole;OT,OutflowTract;HT,HeartTube;VP,VenousPole;RV,RightVentricle;LV,LeftVentricle;RA,RightAtrium;LA,LeftAtrium;PA,PulmonaryArtery;A;Aorta.）

心脏细胞类型示意图

胚胎和成年心衰基因重编程的示意图

参考文献

1.ShyamSundarNandi,ParasKumarMishra.Harnessingfetalandadultgeneticreprogramingfortherapyofheartdisease.JournalofNatureandScience,Vol.1,No.4,e71,.

2.Tavakoli,R.,Nemska,S.,Jamshidi,P.,Gassmann,M.,Frossard,N.TechniqueofMinimallyInvasiveTransverseAorticConstrictioninMiceforInductionofLeftVentricularHypertrophy.J.Vis.Exp.(),e,doi:10./().

3.刘宝辉，李明凯，罗晓星，俞世强。心力衰竭实验动物模型构建方法研究。中国心血管杂志年6月第18卷第3期。

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